产品简介
● 建诺为生物慢病毒浓缩试剂为研究者提供了一种简单、快速、高效浓缩慢病毒颗粒的方法。操作简单,无需超速离心,只需将收获的慢病毒上清液与5×浓缩试剂按比例混匀,4℃孵育一段时间,然后使用普通的离心机离心,即可得到浓缩比例高达100倍以上的慢病毒颗粒,回收率超过90%。
产品特点
产品规格
使用说明
1
慢病毒包装成功后,收集慢病毒上清液,0.45 μm滤器过滤,去除细胞和碎片;
【注】如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜,不能用硝酸纤维素膜(NC)。
2
按4:1的比例混合慢病毒上清液(4份)和5x慢病毒浓缩液(1份),4℃孵育2小时或过夜。刚开始时每隔30min混匀一次,混匀进行3次,也可使用摇床直接4℃慢摇过夜;
【注】延长孵育时间可以提高回收率,慢病毒颗粒在4℃可以稳定保存数天。
3
3. 4°C,4000g离心25min;
4
小心去除上清,不要晃动管子,一般可见白色沉淀(有时沉淀不可见),静置1min后再次弃尽残留上清;
【注】应尽量避免吸走离心沉淀物,该沉淀物为慢病毒颗粒。
5
用初始体积(原上清液体积)1/10 -1/100的慢病毒保存液重悬病毒颗粒,使用移液器小心吹打,重悬沉淀物;
【注】重悬病毒沉淀时,吹打操作要轻柔,可选择完全培养基、FBS或建诺为生物慢病毒保存液重悬病毒。
6
重悬后的病毒以50μL/管分装,-80℃冰箱保存;同时,可取少量病毒测定滴度。
【注】应尽量使用新鲜病毒液,避免病毒反复冻融,否则会降低病毒滴度。
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