什么是核酸?
核酸是地球上所有已知的生命体必不可少的一种组成物质。它主要分为两种:脱氧核糖核酸、核糖核酸。
脱氧核糖核酸,其实就是我们常说的DNA,地球上几乎所有生物的遗传物质。而许多冠状病毒的遗传物质,则是RNA,也就是核糖核酸。
所以病毒核酸检测,其实就是对病毒的遗传物质RNA进行检测,一般可以分两种:一种是实时荧光RT-PCR,一种是病原宏基因组测序(mNGS)。它们都可用于诊断新冠病毒感染的方法。但核酸检测因为速度快(4~6小时)而应用更多,而基因测序比较慢(24~72小时),所以用的比较少。一般对于高度疑似新冠病毒感染、但核酸检测是阴性的病人,会利用基因测序技术进一步确认。
图 冠状病毒:外层是包膜和蛋白质,里面是遗传物质RNA。
核酸检测--样品经历了什么?
1)采集样品
图 疫区人的日常:做核酸-上班-回家-做核酸...
2)核对信息
核酸检测中集采的样品在“全副武装”下被送到检测实验室。
接收到样品后,进行全方位消毒,工作人员做好生物安全防护,核对信息,录入系统。
整个过程需要全手工,并不会比取样快多少。并且在大批量样本录入的情况下,确保零差错。
3)手工加样
这个步骤依旧是需要手工完成,还是个精细活儿。
图 加样:快、稳、准
4)提取核酸
按要求加好样本后,就需要加入试剂进行核酸提取。PCR实验室人员使用专用核酸提取仪,将标本里面的核酸提取出来,才能进行扩增。
图 核酸提取及纯化
5)扩增与检测
通过反转录技术(RT),把病毒的RNA“反转”成一种特异DNA,即cDNA。扩增的同时,试剂盒中还有一种叫荧光探针的东西同时工作。它会释放荧光信号,每完成一次扩增,荧光信号就会增加一点,而PCR检测仪就能记录到一个荧光信号增加的Ct值。
图 扩增过程:反转录技术--cDNA--cDNA扩增--荧光探针--检测Ct值
6)报告结果
结果出来后,还需要查看结果,核对信息,结果发放,数据上传。
图 结果报告
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