
糖类物质的精确分析是食品、药品及生命科学研究中的重要环节。面对结构高度相似的糖类分子,如何实现有效分离与准确定量,已成为分析化学领域的经典课题。
一、糖类分析的挑战
糖类化合物的核心特征之一在于其羟基密集型结构。这种结构赋予糖类极强亲水性,也导致它们在传统反相色谱中保留极弱,难以分离;核心特点之二在于其同分异构体众多,物理化学性质相似,传统方法区分度弱;核心特点之三在于绝大多数糖类缺乏发色团或荧光基团,通常无紫外吸收。
二、常用检测方式及特点
基于糖类物质通常无紫外吸收的特点,我们可有以下操作方式:1)衍生化+荧光检测:该方法反应位点较多,副产物及反应率可控性差,会引入更多操作、试剂、方法不确定性;2)RID直接检测:检测灵敏度较弱,且无法进行梯度洗脱,对温度和流动相变化极为敏感,基线稳定性较差,适用于简单组分且高浓度样品;3)ELSD直接检测:灵敏度相对较高,可梯度洗脱,但仍对样品浓度有较高的要求。
氨基柱:利用硅球表面键合的氨基,以亲水作用力差异为主,实现分离。氨基柱自身对流动相比例、pH等条件较为敏感,操作稳定性相对较差,且键合相易流失,色谱柱寿命不佳。通常适用于简单糖类物质的分离检测。
糖柱:以苯yixi-二yixi基苯共聚物为基质,键合不同的阳离子,提供离子交换/离子排阻、分子排阻等多种作用方式,实现糖类物质及其它有机酸类物质的分离。其通常耐高温,但填料机械强度相对较差,能承受的最大流速相对较低,同时,不同的离子柱会对禁用淋洗液有要求。更适用于复杂组分(糖/有机酸)的分离检测。
三、应用分享
Venusil Honey糖类检测专用柱(4.6×150mm,5μm,P/N:VN851505-H;4.6×250mm,5μm,P/N:VN852505-H),针对GB 5009.8-2023食品安全国家标准《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》设计,提高五中糖的分离度,同时通过优化填料工艺,显著改善氨基柱寿命问题:
五种糖检测:

真实蜂蜜样品,色谱柱寿命测试:进样1200针后,仍具有良好的基线分离。

Rezex系列色谱柱,多种离子形式(氢、钙、银、铅、钠、钾)规格齐全,检测有机酸/复杂糖样:

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*部分信息来自phenomenex官方
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