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材料：0.5 M NaOH溶液、纯化水、无尘纸

操作：

1. 接触样品的管路外壁擦拭干净，放入纯化水中洗泵。

2. 将进样管路放至0.5 NaOH溶液中，洗泵。

3. 管路设定为Direct inject, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out-waste, 设置合适的Sample flow，冲洗一定体积。

4. 管路在0.5 NaOH溶液浸泡30 min左右。

5. 用纯化水将管路中的0.5 M NaOH冲掉。

6. 结束程序。

材料：0.5 M NaOH溶液、纯化水、无尘纸或厨房用纸

操作：

1. 将接触蛋白样品的outlet管路外壁擦拭干净。

2. 使0.5 M NaOH溶液充满系统管路。

3. 管路设定为Inject valve-Direct inject, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out valve-outlet, 用0.5 M NaOH溶液冲洗一定体积。

4. 冲洗完成后，将outlet管路浸于0.5 M NaOH溶液中，浸泡30 min左右。

5. 用纯化水将系统管路和outlet管路中的NaOH冲掉。

6. 结束程序。

材料：0.5 M NaOH溶液、纯化水

操作：

1. 用纯化水充满系统管路；执行Manual Instructions -> Fraction collection -> Accumulator wash命令，即用水清洗收集器管路。

2. 使0.5 M NaOH溶液充满系统管路；执行Manual Instructions -> Fraction collection -> Accumulator wash命令，即用0.5 M NaOH溶液清洗收集器管路；命令结束后，静置30 min左右。

3. 用纯化水充满系统管路；执行Manual Instructions -> Fraction collection -> Accumulator wash命令，即用水冲掉0.5 M NaOH溶液。

4. 结束程序。

材料：纯化水

操作：

1. 将实验用到的管路放至纯化水中，执行pump wash命令清洗。

2. 设定流速，用水冲洗系统管路。

3. 结束程序。

材料：纯化水、注射器、厨房用纸

操作：

1. 管路设定为Injection valve-Inject，注射器接满纯化水，将loop环中高盐溶液冲掉。

2. 将柱位阀等仪器外表擦干，厨房用纸蘸取水或75%乙醇进行擦拭；换新的湿润厨房用纸再次擦拭，尽量减少盐的残留 。

3. 结束程序

材料：泵润洗液（20%乙醇）、注射器、50 ml离心管

操作：

1. 泵速降为0，丢弃旧的润洗液。

2. 用新的离心管装取50 ml 20%乙醇，安入相应位置，使润洗液进液管没入其中。润洗液流动方向为从泵上端进入，从泵下端流出。

3. 拔出润洗液回流管，用注射器缓慢吸出管路中残留的旧润洗液，约20 ml，丢弃。回流管重新放回离心管中。

⚠注意：

• 需正确区分润洗液进液管和回流管。

• 进液管需浸没于润洗液中，最好伸到离心管底部。

• 用注射器缓慢吸出管路中残留的旧润洗液时，应缓慢吸取。

• 系统泵和样品泵的润洗液均以上述步骤进行更换。

材料：无尘纸、洗瓶、纯化水或20%乙醇

操作：

1. 在Manual Instructions对话框中，选择Fraction collection->Frac cleaning position，执行此命令，dispenser head移至清洁位置，系统暂停。

2. 打开收集室，用水或20%乙醇清洗dispenser head及感应器，用无尘纸轻轻擦拭。

3. 用无尘纸吸干感应器表面剩余液体。

4. 结束程序。

⚠注意： 

• 避免感应器表面被划伤。

• 注意收集托盘及收集室内是否洁净，可将托盘拿出进行清洁，擦干后重新放入收集室。

材料：20%乙醇

操作：

1. 将所有管路浸没至20%乙醇溶液中，对各管路进行pump wash。

2. 管路设定为Inject valve-Manual load, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out valve-waste, 设置一定的system flow，管路充满20%乙醇。

3. 设置out valve-outlet，将outlet管路充满20%乙醇。

4. 设置out valve-fraction，收集器管路充满20%乙醇。

5. 结束程序。

频次：每月 

材料：纯化水

操作：

1. 管路浸没于纯化水中。

2. 管路设定为：Manual Load, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out-waste, system flow rate 3.0 ml/min；记录PreC pressure。

3. 将restrictor改为off-line，继续运行，记录PreC pressure。

4. 两压力之差应为0.2±0.05 MPa。

5. 结束程序。

频次：每月 

材料：注射器、pH校准液（pH7.00、pH4.01）、纯化水

操作：

1. Ready状态下，在System中选择Calibrate -> pH，点击prepare for calibration。

2. 注射器吸取纯化水10 - 20 ml冲洗pH电极。

3. 将pH for buffer 1改为7.00；吸取pH7.00校准液，推入10 – 20 ml，待pH示数稳定时，点击calibrate。

4. 注射器吸取纯化水10 - 20 ml冲洗pH电极。

5. 将pH for buffer 2改为4.01；吸取pH4.01校准液，推入10–20 ml，待pH示数稳定时，点击calibrate。

6. 记录斜率与不对称电位。

7. 纯化水洗电极；注射器注入饱和KCl溶液，保存电极。

频次：每月 

材料：纯化水 

操作：

1. 管路浸入纯化水中。泵排气，洗泵。

2. 管路设定为：Injection Valve Manual Load, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out-waste, system flow rate 如上表，gradient 0% B, 运行；取50 ml离心管，称皮重，将outlet 1放入此离心管中， 插入outlet valve outlet 1、timer 1 min pause命令，执行。系统暂停后，称量离心管中纯化水的重量 ，计算A泵流速。

3. 设置gradient 100% B，检测B泵流速。

4. 管路设定为： Injection Valve Direct Inject, column bypass, pH off-line, restrictor inline, out-waste, sample flow rate 如上表，运行；取50 ml离心管，称皮重，将outlet 1放入此离心管中， 插入outlet valve outlet 1、timer 1 min pause命令，执行。系统暂停后，称量离心管中纯化水的重量 ，计算S泵流速。

5. 结束程序。

材料：无尘纸、纯化水或75%乙醇

操作：

1. 关闭仪器。

2. 用干的厨房用纸擦拭仪器溶液托盘及仪器表面的灰尘。

3. 若仪器配件上有较多盐，可用厨房用纸蘸取水或75%乙醇进行擦拭；换新的湿润厨房用纸再次擦拭，尽量减少盐的残留。

频次：数月/恶劣实验条件结束后

材料：在线滤膜、镊子

操作：

1. 泵速降为0。

2. 拧下混合池顶端，镊子取下在线滤膜，换上新的滤膜。

3. 重新拧紧混合池顶端。

频次：压力异常时

操作：

1. Ready状态下，在System中选择Calibrate-> System/Sample/PreC/PostC pressure.

2. 将连接相应压力检测器的接头旋开，使压力检测器处于零压力状态。

3. 点击Reset pressure。

4. 重置后，将管路重新接好。

⚠注意：

零压力状态下，压力检测器示数不在±0.02 Mpa范围中，或环境温度变化超过5℃，则应进行压力校准。

预防性保养：建议每年联系厂商对AKTA进行专业维护保养，包括更换易损件（如密封圈、柱塞）和全面性能校准，以保证设备长期稳定的运行。

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