
PBS是什么?
PBS(Phosphate Buffered Saline),全称磷酸盐缓冲盐溶液,生物化学研究中最广泛的一种缓冲液,核心价值在于能够模拟生理环境,为细胞和生物分子提供一个温和、稳定的外部条件。
主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

理化特性&核心功能
标准配方包含四种无机盐:氯化钠、lvhuajia、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾。通过这四种成分的精确配比,PBS实现了几大核心功能。
🔍维持pH稳定
磷酸盐系统(H₂PO₄⁻/HPO₄²⁻)使其在生理pH范围内具有强大的缓冲能力,能有效抵抗实验中可能出现的pH波动,通常维持在7.2-7.4之间,在细胞最适生理范围。
🔍渗透压平衡
NaCl和KCl浓度使溶液渗透压与细胞质液环境高度匹配(约290 mOsm/kg),防止细胞脱水皱缩或吸水涨破。
🔍生理相容性
离子组成和浓度接近生理条件,对细胞无毒性。
理想溶剂:作为胰蛋白酶/EDTA、无血清培养基、流式抗体等试剂的基础
⚠注意:注:PBS有时会与“磷酸缓冲液”混淆,后者通常不含氯化钠和lvhuajia,不能提供等渗环境,因此不可直接替代PBS用于细胞相关实验。
应用场景
应用覆盖细胞生物学、免疫学、生物化学和诊断学等多个领域,扮演着“wanneng缓冲液”的角色。
基础缓冲液
溶解或稀释生物活性物质(如酶、抗体、细胞因子),提供生理pH和渗透压环境,防止蛋白变性。
细胞培养
•细胞洗涤:去除旧培养基残留,为胰酶消化做准备
•消化终止:中和胰蛋白酶活性,防止过度消化损伤细胞
•细胞收集:彻底冲洗培养表面收集所有细胞
•细胞计数:提供等渗环境确保计数准确性
免疫学实验
•ELISA实验:作为洗涤缓冲液,去除未结合物质
•Western Blot:稀释抗体和洗涤膜
•免疫组化/流式细胞术:细胞洗涤和稀释抗
分子生物学
•DNA/RNA提取:样品预处理和稀释
•病毒核酸检测:如猴痘病毒核酸制备
•电泳缓冲液:琼脂糖凝胶电泳的缓冲
溶液配制与储存
PBS试剂的主要成分为:
•磷酸氢二钠(Na₂HPO₄):作为共轭碱
•磷酸二氢钾(KH₂PO₄):作为共轭酸
•氯化钠(NaCl):提供适当的离子强度和渗透压
•lvhuajia(KCl):补充钾离子
标准配制方法:
根据公式m=CVM计算
(m为质量,C为浓度,V为体积,M为摩尔质量)
称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na₂HPO₄、0.24g KH₂PO₄溶于800mL蒸馏水中,用HCl调节pH至7.4,最后加蒸馏水定容至1L。

⚠注意:
常见变体DPBS:即杜氏PBS,是细胞培养中的标准配方,其成分浓度更精细。DPBS缓冲液与 PBS缓冲溶液的不同之处在于它还包括lvhuajia,并且提供多种配方。它也用于生物应用,水基缓冲液,包括氯化钠和磷酸盐缓冲液。
商业PBS则有 1×(即用型)和10×或20×(浓缩型) 等规格,浓缩液需要按比例用无菌去离子水稀释后使用。
仅限科研:商业PBS试剂明确标识“仅供科研使用”,不可直接用于临床诊断或人体治疗
溶液保存
配制或稀释后的PBS建议过滤除菌(0.22μm滤膜),并分装保存于2-30°C。开封后应注意无菌操作,尽快用完,避免微生物污染。
无菌原则:所有接触活细胞的操作必须使用无菌PBS,并在超净台内进行。
低温沉淀:PBS在低温储存时可能析出磷酸盐晶体,使用前可恢复到室温并确保沉淀完全溶解、溶液澄清。

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