【技术干货】抗体偶联药物（ADC）的LC/LC-MS分析解决方案！

什么是抗体偶联药物（ADC）？

通过一个化学链将具有高毒性活性的小分子药物连接到单抗上，单抗作为载体将小分子药物靶向运输到目标细胞中。

敲重点

ADC由三部分组成：

抗体、Linker、小分子化药毒物

01ADC药物的特点和作用

为什么ADC药物让研究者们爱不释手呢？那就要说说它的特性和作用了！

它既具有细胞毒药物杀伤力强大的特点，又结合了重组单克隆抗体（mAb）高度的靶向性、稳定性和有利的药代动力学特征。靶向性使得ADC药物能够在茫茫细胞中寻找特定的肿瘤细胞，小分子药物的高毒性达到了仅用少量小分子药物就能杀灭整个癌细胞。

这么高效、精准谁能不爱呢？

02ADC药物质量控制

这么多的优点，当然也需要严格的质量控制要求。

ADC药物的质量评价对于企业和监管部门都是全新的挑战，因为其不仅是生物制品和化学药品的叠加。DAR比值和药物分布是关键性指标，会直接影响ADCs药物的安全性和有效性，其次，效价、纯度、杂质检测、pH值等也是常见检测要求。

作为直接影响ADCs药物安全性和有效性的DAR，我们今天来着重讲一下。

DAR，中文名称为药物抗体比，是指抗体偶联上毒素小分子数量的平均值，直接反映了靶向肿瘤细胞的载荷数量，主要有两种分析方法：

• 液相色谱柱法

• 液相色谱串联质谱法

艾杰尔-飞诺美针对这两种分析方法分别有对应的液相色谱柱产品应用案例。

液相色谱法—RPLC-UV方法

采用反相高效液相色谱法（RPLC-UV），检测通常是在还原水平上分析DAR。以检测曲妥珠单抗Mc-MMAF半胱氨酸偶联物的平均DAR（来源于ADC BiotechnologyLTD）举例，飞诺美（Phenomenex）采用Biozen Intact XB-C8色谱柱进行检测。

检测条件：

色谱柱：Biozen Intact XB-C8，3.6um

货号：00F-4766-AN

规格：150*2.1mm

流动相A：0.1%TFA水溶液

流动相B：0.1%TFA in ACN

流速：0.4mL/min

检测：LC-UV（280nm）

图1曲妥珠单抗Mc-MMAF半胱氨酸偶联物的平均DAR

Biozen Intact XB-C8色谱柱，对于ADC的DAR值分析拥有改善蛋白质回收率、高温稳定性，以及实现更高效率的Intact RP等优点。

液相色谱串联质谱法—非变性质谱法

非变性质谱法采用质谱兼容的近生理pH值的溶液体系 (主要为醋酸铵)和更温和的电离方式，使生物大分子在气相中能够保持自然折叠状态、非共价相互作用和相关的生物学功能。

SEC-MS非变性质谱也常用于ADC DAR的分析与质控。相对于HIC-MS来说，流动相可选择挥发性的盐溶液与质谱更加兼容。

飞诺美（Phenomenex）分析市售（Sigma采购）的半胱氨酸链接的ADC模拟物，采用Biozen SEC-2鉴定DAR 0到8。结果平均DAR计算为3.4，与Sigma报告值4.0±0.8匹配。

检测条件：

色谱柱：Biozen 1.8um SEC-2

货号：00F-4769-E0

规格：150*4.6mm

保护柱：柱套AJ0-9850；柱芯AJ0-9000

流速：200uL/min

温度：25℃

设备：QTOF（SCIEX X500B）

图2半胱氨酸链接的ADC模拟物

Biozen SEC-2色谱柱采用低空隙体积的硅胶，实现更好的稳定性和重现性，同时采用了独有的亲水性二醇类键合表面，能够防止硅胶表面与蛋白质样品相互作用。

艾杰尔-飞诺美针对ADC药物的整个过程的质量分析提供了完整的解决方案！

ADC药物质量分析可以直接找对应产品哦~

方便又快捷！

更多资讯请关注商城——柏澳集（www.biology-market.com）