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【技术干货】病理切片不容易，绝世刀法还需练；选对刀片，成功一半

发布时间：2024-03-18作者：管理员来源：本站分类：技术专栏

看似简单的病理切片，可能稍不留神就失败了

切片厚薄不均；切片皱褶太多；切片不能完全展开；切片总是弯带，到底怎么才能做好病理切片啊

病理切片：就是从患者病灶处取出的组织，通过一系列处理后，制作成可以通过显微镜观察的玻璃薄片

病理切片技术根据实验方法和原理不同分为六类，其中常规病理技术、免疫组化病理、细胞学病理、特殊染色技术使用较多。

常规病理技术：包括石蜡组织切片和冰冻组织切片；
石蜡组织切片：通过某些溶剂将组织中的水分置换出来，然后用石蜡/包埋剂将组织包裹，经过切片机切片薄片，然后染色，在显微镜下观察组织细微结构的过程；
冷冻切片：是一种在低温条件下将组织快速冷冻到一定硬度，然后进行切片的方法，因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多用于手术中的快速病理诊断；
免疫组织化学技术：是应用抗原抗体特异结合原理，通过化学反应使组织细胞内抗原显色，从而对其进行定位、定性及定量的研究的一种技术手段；
细胞学病理：对获取的脱落细胞或细针穿刺细胞进行涂片，观察细胞的形态和结构；
特殊染色技术：利用特殊染液直接显示细胞内外特殊化物（黑色素、淀粉样物质、基底膜等）。

病理诊断是目前可靠又准确的检测手段，有金标准支撑。通常人体组织经手术切除后会送到病理科，制片人首先会将组织切成3~5mm厚的切片，经过H&E染色，在显微镜下观察组织形态的变化。70%~80%的疾病可通过H&E染色技术进行判断，不能判断的会联合免疫组化技术和分子检测综合进行判断。

切片制作方法

病理切片实验中一般需要对组织进行切片制作，目前切片制作的常用方法主要是石蜡切片和冰冻切片。

切片常见问题与解答

切片厚薄不均
切片微动部分失灵，齿轮跳格。修理切片机失灵的部分，调整螺旋。加机油润滑零件，必要时需请专业技术人员调整切片机
切片机上的组织夹持器未拧紧，刀片角度太大或太小。拧紧组织夹持器，调整好刀片角度。
蜡块太大，转动时刀刃受震动。以后取材时注意取材的大小。
蜡块过硬，转动时刀刃受震动。可返回水中浸泡，再重新脱水和包埋。

切片皱褶多不能完全展开
石蜡太软。可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。
室温过高。可开空调降低室温。
切片刀上粘有残余的石蜡，刀口不干净。可用棉花沾少许二甲ben将刀口拭干净。
组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。重复浸蜡过程。
切片刀不锋利。将切片刀磨锐利再行切片。

石蜡切片总是弯带
蜡块上下或左右两边不平行。将蜡块四边反复修平对称。
蜡块与切片刀刀口不平行。调节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。
组织块外形不整齐。修整组织块时，注意修切整齐。
切片刀各处的锋利程度不一致。移动切片刀，更换刀口位置。

切片上出现裂纹
切片刀上有小缺口。可调换刀口部位或重新磨刀
刀口不平整。可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规磨刀田。
组织中可能含有较硬之物质，如固定液之结晶石灰质。组织中硬性物质太多，则不宜用
包埋时石蜡冻结太慢。纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放入冷水中。

切片粘在切片刀不易取下
切片时有静电作用，产生静电吸引，在冬季或气候干燥时常出现这种情况。可用加湿器。以增加空气中的水分，减少静电作用。

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