皮下成瘤实验

皮下成瘤实验就是将细胞或组织通过原位或皮下移植到小鼠体内使其成瘤，在肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价及有效药品的筛选等实验方面，有着很高的研究价值。

皮下成瘤实验一般选择4-8w龄的小鼠，雌雄均可，接种部位选择皮下。一般鼠源肿瘤细胞接种2～100万/只，而人源肿瘤细胞则需要200-1000万/只以上，接种后一周左右可见到皮下产生肿块，根据肿瘤细胞的特性以及接种的细胞量，一般皮下成瘤的周期为1~2个月。

以HepG2细胞裸鼠皮下成瘤实验为例，采用ABW® Matrigengel 高浓度基质胶（0827245）和细胞悬液进行1：1比例稀释，皮下接种至4-5周龄的BALB/c-nu雌性小鼠，实验流程如下：

常见的荷瘤不成功可能的原因？

（1）细胞状态差，活力不好，或肿瘤细胞不易成瘤，需加入Matrigengel辅助或增大接种量或更换细胞系；

（2）可能是小鼠周龄太大，或小鼠免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠（Nod-scid小鼠，NOG小鼠＞Nude裸鼠）。

肿瘤长起来后又消失的原因？

肿瘤生长过程中，如果出现肿瘤块先缩小，后变大的现象，很可能是由于炎症反应，肿瘤细胞被小鼠自身吸收造成的，如若后续肿瘤依旧未长出来，可考虑更换免疫缺陷程度更大的小鼠。

造成肿瘤均一性很差的原因？

如果同一分组内小鼠肿瘤体积差距很大，可能是由于小鼠的周龄及接种细胞量不一致造成的。

是否可以应用免疫抑制剂加速肿瘤生长？

如果裸鼠荷瘤不生长，可以采用免疫抑制剂如环磷酰胺（抑制裸鼠NK细胞活性）促进生长；不过最好不要为了缩短造模周期来加速生长，因为可能会造成溃烂，这样就不得不中止实验。