很多时候，我们需要把细胞冷冻起来，以便于长期保存，以备不时之需。而复苏，就是使冷冻的细胞苏醒过来，恢复活力。
我以为的细胞复苏：冻存管取出，37℃水浴，离心，换液，培养。后来真正上手养了一段时间细胞才发现短短的操作过程中尽是“Bug”啊！
冻存管“爆炸”事件
关于细胞传代和冻存，小编不想有过多的赘述，这里只唠叨一下如何在复苏时正确保护自己，总结下来，希望小伙伴们能爱惜自己。
液氮渗入冻存管内，当把冻存管从液氮罐取出时，液态氮挥发，导致体积迅速膨胀而不能及时排出引起爆炸。具体原因就是:
冻存管质量差
操作不规范
保护配套不到位
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冻存管
用进口的冻存管；没有的话就尽量使用内旋的冻存管，这样液氮气化时相对于外旋的冻存管容易排出，不易爆炸；如果只有外旋的冻存管，那么取出后就尽快倒置冻存管或者水平放置数十秒，等液氮流出后再复苏细胞。
冻存管的外旋和内旋
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冻存液
冻存细胞时尽量加多一点冻存液，比如2ml冻存管加1.8ml冻存液，保留少量空间。推荐国产建诺为无血清细胞冻存液：复苏后细胞质量及活率一点不虚进口大牌冻存液，最重要的是价格亲民，性价比之王实至名归。
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冻存管套
有时冻存管和冻存瓶需要额外保护。这种情况与储存在液相或气相氮中的情况相似，或者与运输样品时的情况相似。这些低温储存附件在设计时考虑到了操作的安全性。
注：部分小伙伴说可以用封口膜代替冻存管套，且不去考虑材质的问题，我们使用冻存管套的目的是隔绝液氮与冻存管直接接触，营造气相液氮环境，这样相对温度会低些。而封口膜并不能完全阻止液氮进入，且液氮更容易残留在管壁和封口膜之间，更加危险！
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低温冷冻技巧
这个因素跟冻存管破裂关系并不大，只是会影响复苏后细胞质量及活率，在这里捎带跟大家提一嘴。
快速降温：水分流动时间短，细胞内外渗透压改变程度小，但大量水分留在细胞内造成大量胞内冰晶形成，使得胞器损坏。
慢速降温：冰晶由细胞外开始形成，造成胞外渗透压变小，细胞内水分移动至细胞外造成细胞脱水。
这些影响都会让细胞损伤、凋亡或坏死，也可能造成复苏后细胞存活率低、细胞形态改变、细胞功能丧失、基因变异等现象。
有没有又省时间又能够很好的对细胞进行降温的工具呢？小编在这里跟大家推荐一款：Thermo的程序性降温盒
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操作事项
从液氮里转出来的时候，先不着急直接拿出来，在液氮上面的蒸汽里放一阵，然后再转出来；手带棉手套，从液氮罐里取出提篮。取提篮应慢，然后取出冻存管，室温下放十几秒。然后直接用带棉手套的手拿着冻存管管盖处，置于37度水中融化，从来就没爆过。
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